ROTO300 C4（黄色键）或C18（绿色键）的旋转柱将保存非极性溶质，例如肽，蛋白质和去污剂。 盐和极性溶质（如DNA）将不会保存，然后答应从MS样品中除掉盐和SDS或经过疏水性差异进行开始分馏。 运用0.1％的TFA将添加肽和蛋白质的结合。

  Nest Group公司产品大多数都用在别离和纯化蛋白质，肽，核酸和相似药物分子。大范围的应用于质谱职业，制药职业和根底科学研究范畴。

  调理色谱柱：用移液器汲取200L的调理溶剂（例如100％乙腈或将MeOH）注入柱中并离心，直到在Eppendorf上以约55x g（@〜400 rpm）“枯燥”微型离心机）。

  平衡柱：用移液管汲取200l平衡溶剂（例如2％乙腈或MeOH）注入柱中，并离心直至“枯燥”。重复一次。取下搜集管并吸干柱子外部的水分。

  处理样品：（注：运用定角转子时，在上侧符号列的。在随后的一切离心过程中，将色谱柱置于离心机中，符号朝外。定向不正确会导致收回功率下降。也太高了旋转速度会下降结合和/或洗脱功率。）将25-100L的样品上样至将该柱放入新的2ml离心管中。旋转试管直至“枯燥”至〜55x g。保存肽，蛋白质和去污剂，一起保存盐和极性溶质，例如DNA和烷基化试剂将洗脱。丢掉扔掉这些液体，除非这些是您要遵从的分子。用50-100l的上样液或平衡缓冲液冲刷，以洗去您感兴趣的样本中任何微量的盐分。

  开释样品：添加25-100l的80％MeCN或MeOH，以*潮湿玻璃料，优选包括25mM甲酸或其他挥发性电解质。如上旋转。肽和蛋白质将在搜集管的液体中。假如样品特别对错极性的，则在大多数情况下要重复此过程以洗脱一切样品（请拜见下面的SDS注释）。假如特别是极性的，然后在含有0.1％TFA的100％水中结兼并平衡，或许运用更多坚持性（用于亲水性化合物），可水潮湿，BioPureSPNTARGA®C18（货哈：HEMS18R）

  能够经过在两倍体积（50 L ea。）的100％MeCN，MeOH或含25 mM甲酸（水溶液）的n-PrOH中洗刷3次来重复运用色谱柱。枯燥不会影响功能。寄存期间盖上盖子。再次运用前，用两管体积（200L ea。）的上样液或平衡缓冲液清洗。

  样品组成：重要：样品和平衡缓冲液应包括适当数量的乙腈（例如0-5％）。不然，极性溶质（例如肽和蛋白质）或许不会保存。包括0.1％TFA会添加肽捕获的结合才能。假如流经的产率较低，请下降样品的有机溶剂浓度。

  SDS洗脱：SDS从C18色谱柱以60-65％MeCN洗脱。假如您的剖析物极性更大，请用50％MeCN洗脱，以避免SDS脱离色谱柱。运用过多的冲刷或洗脱体积会促进等度洗脱，因而请将这些体积限制为一个无效体积（50L）。或许，运用HILIC SPE将保存肽段并在上样期间洗脱SDS，然后答应在100％水中洗脱肽段。

  更具体的运用说明和需求留意的几点，请联络咱们，能够讨取原厂英文说明书和咱们公司技术上的支撑辅导。

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