反相高效液相色谱柱C18维护柱阐明
pH pH:引荐 pH 运用约束规模为2~8。 温度:假如活动相黏度较高,可采用升高柱温的方法以进步别离功率。尽管最高操作温 度为70℃,可是,为了更长的惯例运用的寿数,主张最佳操作温度为50℃,在温度高于70℃下连 续运用,或许损坏色谱柱,尤其是在 pH8或 pH2条件下,对色谱柱损坏更大。 流速:关于5um 250×4.6mm 色谱柱,规范流速为1mL/min。 柱维护:为防止活动相或样品中的杂质,在色谱柱之前最好装置一个维护柱或预柱。 通常状况下,预柱能阻挠来自于样品、活动相、泵或进样器的杂质,对色谱柱起到维护效果。
酸性及两性小分子化合物的剖析。 关于酸性和两性化合物,调活动相到 pH 2~3左右质子化酸 性官能团时可获得极佳峰形和杰出别离。关于碱性化合物,调活动相到 pH 1~3时可获得比较 好的峰形。但在许多状况下,也可将活动相 pH 调至4~8乃至更高,以保持化合物稳定性或改 变别离选择性。pH 4~8时引荐运用10~100mM 缓冲盐溶液。关于峰显着拖尾的强碱性化合 物,引荐添加10~20mM 三乙胺或5~10mM 二甲基辛胺改进峰形。这样一个时刻段特别引荐运用 BetaBasic C18或 TX 产品。 柱功用 Innovation TM ZW&A C18色谱柱功用参数(柱效、拖尾因子、测验条件等)详见产品测验 证书。 色谱柱装置和运用 旋下色谱柱两头柱头,依照色谱柱标签上液体活动方向将其衔接于仪器。色谱柱不运用 时,旋上两头柱头。 样品和活动相 为了尽最大或许防止阻塞色谱柱,样品和活动相运用前,须过0.45um 滤膜、乃至孔径更小的滤膜。 活动相为有机相和水相混合相,例如甲醇-水、乙腈-水。活动相脱气后方可运用。 操作留意点 承载溶剂:因为 C18键合相为非极性相,因而,活动相最好为甲醇-水、乙腈-水等混合相。 正常的状况,跟着有机相份额的添加,样品的保存时刻会缩短。梯度洗脱时,10%甲醇或乙腈 常作为初始活动相,100%甲醇或乙腈常作为结尾活动相。需求阐明的是,C18键合相能够与 大多数有机相兼容。关于新的色谱柱,柱内含有甲醇(或乙腈)和水混合相,因而,用户初度使 用的活动相中不能含有与之反响的成分。应首先用60%左右甲醇冲刷色谱柱,以除掉色谱柱 在包装和运送过程中引进的杂质。然后运用方针活动相。假如柱压或基线呈现动摇,阐明柱 内有气泡,此刻,应翻开排气阀,一起把流速调至更高,并保持2~5min,以除掉气泡,例如, 关于250×4.6mm 色谱柱,可将流速调至3mL/min。
简介 (1) 高纯度硅胶骨架,重金属含量 5ppm,具有高外表覆盖率; (2) 单功用高密度键合,LC-MS Q1检测无键合相走漏,产品批次之间的不同小于1%; (3) 理论塔板数大于80000/m,极佳峰形; (4) 极高稳定性, pH 2~8条件下接连运转20000床体积, 在 保存时刻, 柱效及峰形改变极小; (5) 部分封端,因而很合适两性和酸性化合物别离剖析。 特征 技术参数 B 型球形硅 运用温度范 胶颗粒直径 (um) 键 合密 度 孔径(Å) 120 (umol/m ) 表
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